病原微生物快速检测的临床研究进展概述

　　摘要：微生物感染是临床常见疾病，但随着新型微生物的不断出现、耐药菌的产生、常见感染病原谱的变迁等原因为微生物病原检测带来很大难度。近年来，我国医疗技术不断发展，病原微生物的检测方法逐渐增多，人们更加关注于检测方法的快速性、便捷性、准确性。本文将重点分析病原微生物的快速检测方式，为临床实际提供依据。

　　微生物感染性疾病发病率高，且随着抗生素等药物的滥用使得微生物的耐药性不断增强，已严重威胁人类的生命安全。微生物感染性疾病治疗的基础与关键为病原微生物的检测，可靠、快速的检测方法可有效提高诊断效率[1]。病原微生物检验方法较多，常见的有分子生物学技术、免疫学技术、生物分子传感器技术等，本文将展开介绍：

　　1、分子生物学技术

　　分子生物学是一种新型技术，在人类发展过程中对生物体的认知由宏观水平逐步发展到微观水平。利用分子生物学技术可有效检测微生物的外部结构、生理特征，同时也可在微观分子水平研究微生物的核酸、细胞结构、分子结构，为医师提供诊断依据。利用分子生物学中的聚合酶链反应、核酸杂交等技术，使得微生物检测更加可靠、灵敏与快速，广泛应用于临床。还有学者利用钩端螺旋体DNA 对flaB 引物进行合成，使用PCR-斑点杂交技术进行检测，其优点包括灵敏、快速，特异性很高。基因芯片技术也是一种新型的分子生物学技术，是为微生物检测的常用办法，其优点较多，如样品用量少、高效快速等，但也存在一定缺点，如敏感性不足、芯片特异性差、成本高。基因芯片技术可应用于耐药性细菌监测，研发抗耐药抗生素等，推动抗感染药物不断发展。

　　2、免疫学技术

　　免疫分析技术也是微生物常用的检测方法，应用时间最长。免疫学方法多样，常见的有酶联免疫分析、生物发光免疫分析、时间分辨荧光免疫分析等。免疫学分析技术具有标本内维生素检验有效，细菌、细胞培养步骤简易，高效快速等明显优势，特别是抗血清凝集技术、荧光抗体检测、酶联免疫法等技术应用广泛，操作简单。有学者曾在猪O 型口蹄疫病毒抗体的检测中使用化学酶联免疫法，结果可见特异性是100%，板内的变异系数为1.10%-6.70%，板间的变异系数为 0.66%-4.80%，特异性、重复性均更好，相比于酶联免疫吸附法，具有更高的灵敏性。

　　3、生物分子传感器技术

　　生物分子传感器是一种新技术，它结合了传感器技术与分子诊断技术，广泛应用于药物筛选、感染病诊断，同时在生物医学、生命科学、临床等领域中受到更多人的重视。DNA 生物传感器属于最为常见的一种生物分子传感器技术，其检测速度快，用时约为20 秒。将多个电化学DNA 传感器整合在同一个基因芯片中，其生物识别具有高度的特异性，电化学敏感性很高[2]。有学者选取隐孢子虫作为研究对象，使用电化学DNA 传感器进行检测，检测限能够达到PPM 级别，被视为微小原虫检测的一种新型方法。还有学者提出，在压电生物传感器电极中固定抗体并添加交流电，通过逐渐增加电压至临界点，即能够获取到样本内病毒粒子，通过病毒结合力的差异对比判断病毒种类。

　　4、细菌毒素技术

　　细菌毒素是细菌所产生的一种致病性毒素，包括外毒素和内毒素，在菌体外分泌的为菌体外毒素，在菌体内或菌体破坏后释放出来的为内毒素。细菌致病性的强弱取决于毒素的独立大小，细菌不同其毒素也存在差异[3]。基于此，可将细菌中的毒素提取出来并进行检测，明确毒素种类和毒力大小以便对细菌种类快速检测，与细菌培养相比其检测结果更加可靠。在国外已经存在毒素VT-1 与VT-2 的检测试剂并上市。通过收集菌体裂解以后释放的毒素并在试剂中培养、静置24h，便可肉眼判断出毒素的凝集现象，此检测方式快速且操作简单。

　　5、流式细胞术

　　流式细胞术是一种综合了细胞化学、光学、免疫学、综合流体学等技术的方法，较为先进，能够从功能水平角度分析细胞的物理性质和化学性质。流式细胞术可对上万细胞快速分析，同时能够满足临床多参数测定、快速测定大量细菌的需求。当前，流式细胞术在食品加工、化妆品制作、水质监测、药品检测等行业中使用广泛。流式细胞术可对微生物功能状态、活性进行检测，广泛应用于有益菌检测。由于流式细胞术在前期运行中成本很高，且样本要求是液体，导致在临床使用中受到限制，在未来的发展中还需要进一步开发[4]。

　　6、总结

　　微生物感染在临床较为常见，感染轻者对人们的日常生活产生影响，感染严重者对人们的生命安全造成威胁，临床需重视微生物感染的检测，同时不断提高检测速度和准确性。近年来随着医疗技术的不断发展以及计算机技术、电化学、临床医学、生物医学等学科间互相渗透，各种新型微生物快速检测方法可达到准确度更高、敏感度更好，经济适用，简单方便的特点，不仅能够造福社会，还可推动我国医疗检验学的不断发展。

　　参考文献：

　　[1]谷钰峰,李昱,孙成铭等.基于分子生物学方法的快速血流感染诊断技术的研究进展[J].医学检验与临床,2018,29(9):24-29,36.

　　[2]王沛.血培养阳性标本病原菌直接快速检测方法进展[J].中华检验医学杂志,2018,41(10):790-793.

　　[3] 何芝菲. 食品病原微生物快速检测技术研究进展[J]. 食品界,2019,(8):78.

　　[4]张诒亮,任玉琰.DNA 生物传感器快速检测病原微生物的临床实验研究[J].中国继续医学教育,2013,(3):5-6.