定西市孕早期妇女叶酸代谢基因多态性检测报告

　　【摘要】 目的 探讨孕早期妇女MTHFRC677T基因多态性与叶酸代谢能力之间的关系。方法 选择2019年12月至2021年9月在定西市人民医院围产中心做产检的1482例孕早期妇女作为研究对象，抽取静脉血，提取全血中的DNA，使用PCR_实时荧光法进行检测MTHFRC677T基因多态性，分析基因频率分布情况。结果 1482例孕早期妇女的MTHFRC677T基因有3种类型，分别为野生型CC、杂合突变型CT、纯合突变型TT，各基因型频率分布依次为CC23.82%、CT48.76%、TT27.40%。结论 定西市孕早期妇女MTHFRC677T基因存在多态性，根据检测结果评估叶酸代谢障碍风险等级，指导高危孕妇合理补充叶酸，为本市预防和干预新生儿出生缺陷以及不良妊娠结局的发生提供可靠依据。

　　叶酸是一种水溶性B族维生素，是人体所需的重要营养素。叶酸具有母胎保护作用。妊娠期叶酸缺乏与胎儿畸形的发生及不良妊娠结局密切相关。有研究显示：妊娠早期叶酸缺乏主要导致胎儿畸形的发生，而妊娠中晚期叶酸缺乏，孕妇易发生胎盘早剥、妊娠期高血压疾病，胎儿易发生生长受限、早产、低出生体重甚至死胎[1]。因此，为了有效降低胎儿发生神经管畸形、心脏缺陷等多种出生缺陷的风险以及妊娠相关疾病的风险，围孕期增补叶酸是非常必要的。妊娠期妇女由于其自身的生理特点，对叶酸的需求量增加，还有因叶酸代谢基因异常引起的叶酸利用能力先天不足，更易发生叶酸缺乏。因此，研究叶酸代谢酶亚甲基四氢叶酸还原酶MTHFR基因多态性具有重要意义。虽然有关MTHFRC677T基因多态性的研究报道很多，但是，定西市孕早期妇女叶酸代谢基因多态性的研究尚未被报道。本文通过检测定西市孕早期妇女的MTHFRC677T基因多态性及基因频率分布情况，探讨其与叶酸代谢能力之间的关系。

　　1 对象与方法

　　1.1 调查对象

　　选择2019年12月至2021年9月在定西市人民医院围产中心做产检的1482例孕早期妇女作为调查对象，年龄18～35岁，平均年龄26.5岁，孕周6～12周，初产妇1230例，经产妇252例。孕前均未服用叶酸。排除胚胎停育、宫外孕、葡萄胎、家族中有严重遗传代谢性疾病患者。

　　1.2 检测方法

　　采用PCR实时荧光探针法。取受检者静脉血收集于EDTA抗凝采血管中，用人MTHFR基因多态性检测试剂手工提取核酸，SLAN-96P核酸分析仪。

　　2 结果

　　1482例孕早期妇女MTHFRC677T基因型有3种，分别为野生型（CC）353例，基因频率23.82%；杂合突变型（CT）723例，基因频率48.76%；纯合突变型（TT）406例，基因频率27.40%。

　　3 讨论

　　3.1 MTHFRC677T基因多态性与叶酸代谢能力之间的相关性分析

　　叶酸代谢酶MTHFR基因有11个外显子，且具有多态性，定位于1号染色体1P36.3位置，MTHFR677位点存在野生型CC、杂合突变型CT以及纯合突变型TT三种基因分型[2]。叶酸在体内的正常代谢途径如下：叶酸首先转化为5，10-亚甲基四氢叶酸，5，10-亚甲基四氢叶酸在MTHFR作用下还原为5-亚甲基四氢叶酸及同型半胱氨酸，后两者需要甲硫氨酸合成酶还原酶的参与才能最终转化为甲硫氨酸完成叶酸的整个代谢过程。亚甲基四氢叶酸还原酶MTHFR和甲硫氨酸合成酶还原酶MTRR是两个叶酸代谢通路中的关键酶，大量研究表明这些酶基因存在多态性，引起酶活性的改变，造成叶酸代谢异常，使活性叶酸水平降低及同型半胱氨酸（HCY）水平升高，血浆（HCY）水平升高与神经管畸形、先天性心脏病和唐氏综合征等多种出生缺陷的发生以及妊娠期高血压疾病、复发性流产等孕期疾病密切相关[2]。由此可见，人体内叶酸浓度与MTHFR酶活性水平密切相关。有文献报道携带MTHFRC677TCT型酶活性只有野生型CC的65%，而基因型TT个体酶活性仅有30%[3]。

　　本研究结果显示：定西市孕早期妇女 MTHFRC677T基因存在多态性，基因分型与国内报道一致，基因型频率分布有差别，可能是研究对象、研究方法、地域及种族的不同，需做进一步的研究。1482例早孕妇女中，携带MTHFRC677T野生型CC者353例，基因型频率分布为23.82%，酶活性正常，MTHFR677位点基因无突变，无叶酸代谢障碍的遗传风险，可以常规剂量（0.4mg/d）补充叶酸，常规产前筛查与孕期管理；携带MTHFRC677T杂合突变型CT者723例，基因型频率分布为48.76%，酶活性下降至65.00%，MTHFR677位点基因杂合突变，叶酸代谢障碍的遗传风险低度，可以增补叶酸剂量（0.8mg/d），孕中、晚期及产后42d，各检测一次贫血3项，了解孕产妇体内叶酸、铁蛋白及维生素B12的水平，有针对性的补充营养素，强化产前筛查与孕期管理，加强神经管畸形、唐氏综合征等出生缺陷筛查与诊断；加强复发性流产、妊娠期高血压疾病、妊娠期贫血等疾病的孕期防控与管理；携带MTHFRC677T纯合突变型TT者406例，基因型频率分布为27.40%，酶活性下降至30.00%，MTHFR677位点基因纯合突变，叶酸代谢障碍的遗传风险中度，叶酸补充方案、孕期管理及产前筛查与杂合突变型CT者大致相同。对携带MTHFRC677T基因CT及TT者，还应监测血同型半胱氨酸水平，预防和干预孕期血栓性疾病、防止胎盘早剥、胎儿生长受限、胚胎停育、胎死宫内等不良妊娠事件的发生。

　　3.2 MTHFRC677T基因多态性与出生缺陷、孕期叶酸补充的相关性分析

　　孕前3个月及孕早期3个月增补叶酸是围产期保健的重要内容，也是国家降低出生缺陷发生率、提高出生人口素质的一级预防措施。有研究显示：中国人群中约29.00%人MTHFRC677T为TT型。母亲MTHFRC677TT纯合子突变使出生神经管缺陷婴儿的风险升高，且妊娠前未服用叶酸的母亲生唇腭裂患儿的风险更高；携带677T等位基因的孕妇比野生型孕妇生育Down综合征儿的风险更大，胎儿患先天性心脏病的概率较CC型基因高，携带677T等位基因的人，其患高血压的风险大大增加，且认为这和同型半胱氨酸水平升高相关[2]。因此，对本研究所检出的406例携带MTHFRC677T纯合突变型TT孕妇，除个体化补充叶酸外，还应该强化产前筛查与诊断，做好防控出生缺陷的二级预防工作。

　　综上所述，通过使用PCR_实时荧光法检测本市1482例孕早期妇女MTHFRC677T基因的多态型及基因型频率分布，可以评估叶酸代谢障碍风险等级，指导高危孕妇合理补充叶酸，为本市预防和干预新生儿出生缺陷以及不良妊娠结局的发生提供可靠依据，同时，有望将MTHFRC677T基因多态型的检测纳入常规围产期保健的范畴。

　　4 参考文献

　　[1] 张蔼,段涛.叶酸的母胎保护作用[J].中国实用妇科与产科杂志,2013,29(12):993-995.

　　[2] 李静,郑玲利,蒋婷,等.叶酸代谢基因多态性的研究进展[J].医药导报,2019,38(2):230-234.

　　[3] 黄卫彤,覃卫娟,李筱瑜.1338例孕前育龄妇女MTHFRC677T、A1298C MTRRA66G基因突变结果分析[J].中国现代医生,2019, 57(13):112-114.

　　[2021-11-02收稿]